Microgénomique et tri cellulaire

Technologies et compétences pour les analyses de cellule unique 

  • Microfluidique (type 10XGenomics) ou kits sans instrumentation, selon le projet, par microdissection laser 
  • Chaîne d’équipements de cytométrie pour l’analyse et le tri cellulaire (Miltenyi Biotech) afin de mieux préparer les cellules ou noyaux avant l’analyse single cell ; 
  • Extraction de nano-quantités d'acides nucléiques ou protéines en collaboration avec la plateforme PAPPSO 

Une des originalités de la plateforme @BRIDGe est la microgénomique, analyse de l’expression des gènes ou l’étude du génome à l’échelle de la cellule.

La microgénomique est, par essence, une discipline faisant appel à différentes technologies (histologie, génomique, transcriptomique, protéomique, biochimie, ...).

Depuis 2004, @BRIDGe propose une approche précurseur des analyses ‘cellule unique’ par la technique de tri cellulaire sur tissu, la microdissection laser par capture (Système Arcturus). Cette technique révolutionnaire apparue en 1996 permet d’isoler des cellules sous contrôle morphologique afin d’étudier leur transcriptome. La plateforme propose un service de tri de cellules mais aussi couplé ou non à la préparation de banques de cDNA à partir d’une quantité de cellules très faible pour vos analyses RNAseq.

Depuis 2021, un Chromium de 10XGenomics, mis à votre disposition par l’unité VIM (INRAE de Jouy-en Josas), est disponible sur la plateforme pour développer et compléter l’offre microgénomique sur la cellule unique. Cette technologie révolutionnaire apparue en 2018, est basée sur la microfluidique permettant l’analyse moléculaire à haut débit simultanée (scRNAseq, scATACseq ou multiome) de centaines ou de milliers de cellules uniques.
Soucieuse d’être à la pointe de la technologie en microgénomique, la plateforme propose aussi des approches en transcriptomique spatiale avec la technologie Visium 10XGenomics qui permet de cartographier l’expression des gènes directement dans leur contexte tissulaire. Cette technologue allie des compétences en histologie pour la préparation des tissus et en génomique pour la préparation des banques qui seront séquencées.

En 2023 l’atelier s’est équipé d’une chaine d’équipements de cytométrie pour l’analyse et le tri cellulaire (Miltenyi Biotech) afin de mieux préparer les cellules ou noyaux avant l’analyse single cell.

La plateforme @BRIDGe offre ainsi plusieurs solutions et des expertises complémentaires dans ce domaine, pour répondre à vos besoins les plus pointus. De par son positionnement au sein de réseaux de plateformes locales, régionales ou nationales @BRIDGe vous offre ainsi la possibilité de réaliser des projets de biologie intégrative.

Dans ce dossier

Des formations théoriques et pratiques sont organisées conjointement par la plateforme @BRIDGe et la société EXCILONE et dispensées par le personnel de la plateforme.

Le plateau de microgénomique apporte son expertise dans le domaine de la microgénomique combinant microdissection laser (LCM) et génomique expressionnelle (qPCR) pour réaliser les tests de faisabilité et protocoles de recherche. Ces collaborations permettent aux utilisateurs d'être en capacité de connaître et analyser le génome exprimé par un type cellulaire donné, dans son environnement tissulaire, ce qui suppose de pouvoir isoler spécifiquement ces cellules et travailler sur de faibles, voire de très faibles, quantités de matériel biologique.

La plateforme dispose d’un atelier de microdissection laser (Laser Capture Microdissection ou LCM) pour l'isolement de cellules.

Le plateau de dissociation, phénotypage et tri cellulaire est composé de 3 équipements dans un L2 accessible aux utilisateurs formés qui permettent de dissocier des tissus, phénotyper par cytométrie en flux et trier les cellules eucaryotes ou procaryotes avant une éventuelle analyse microgénomique ou remise en culture.

Ce dissociateur de tissus permettra d’optimiser les protocoles de dissociation et de garantir l’obtention de suspensions cellulaires viables ou de noyaux de façon reproductible. Pour les applications de génomiques, le temps entre l’obtention de la suspension cellulaire et la fabrication des banques doit être minimisé, la mise à disposition de cet équipement par la plateforme sera donc un atout pour proposer un ensemble d’équipement permettant d’optimiser la qualité des échantillons pour des applications de génomique en cellules uniques. Les analyseurs MACSQuant sont des cytomètres en flux multicolores avec plusieurs fonctions automatisées, de l'entretien à l'analyse standardisée.

La plateforme utilise la technologie Chromium de 10X Genomics pour la préparation de banques single cell.

La plateforme @BRIDGe permet de réaliser les études de transcriptomique spatiale sur la technologie Visium pour les coupes de tissus congelés (multi espèces) ou fixés FFPE (homme et souris).