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Concernant l’isolement de cellules la plateforme dispose d’un atelier de microdissection laser (Laser Capture Microdissection ou LCM). La LCM selon Arcturus est une technologie qui permet d’isoler sous contrôle morphologique différents types cellulaires afin d’analyser le génome et son expression à niveau tissulaire ou cellulaire.
La plateforme propose deux technologies différentes, « capture » et « cutting », sur le même instrument : le système XT Arcturus®. Cette flexibilité permet de répondre à vos différentes demandes sur un grand nombre de tissus. Après microdissection, nous pouvons également réaliser des extractions et des analyses des biomolécules obtenues.
Fort de notre expérience sur de nombreux projets réalisés depuis 2004, nous avons mis au point et optimisé des protocoles qui nous permettent aujourd'hui de réaliser des projets de LCM sur des coupes de tissus congelés ou fixés (FFPE) sur de nombreuses espèces et tissus.
Le système est composé d'un microscope Nikon Inversé TiE, et permet de bénéficier d'une optique de référence et de la modularité d'un microscope de recherche motorisé.
Les deux appareils présents sur la plateforme @BRIDGe sont équipés d'un système qui permet de travailler en fluorescence et donc de visualiser des cellules marquées avant leur capture.
Deux technologies : « capture » et « cutting » sur le même instrument (système Arcturus, ThermoFisher Scientific)...
La technologie " Laser Capture Microdissection " repose sur l'utilisation d'un laser IR (faible énergie) qui permet la capture des cellules par adhésion sur un film plastique. Cette technologie, particulièrement adaptée à l'isolement de cellules uniques (single cells) ou épithéliums, permet de préserver l'intégrité des biomolécules extraites, en particulier les ARN.
Des capsules recouvertes d'un film thermosensible transparent sont déposées sur la coupe à l'intérieur de l'appareil de microdissection laser. Lorsque le laser infra-rouge, basse énergie, traverse la capsule, l'énergie produite par le laser fait fondre le film qui vient alors adhérer aux cellules ciblées.
Lorsque toutes les cellules sélectionnées ont été capturées, la capsule est soulevée de l'échantillon, emportant avec elle les cellules d'intérêt fixées au film, alors que le tissu environnant reste sur la lame.
Grâce aux nombreux projets réalisés sur la plateforme depuis 2004, nous avons mis au point et optimisé des protocoles qui nous permettent aujourd'hui de réaliser des projets de LCM sur des coupes de tissus congelés ou fixés (FFPE) sur de nombreuses espèces et tissus.
La technologie " Laser Cutting Microdissection " s'appuie sur l'utilisation d'un laser UV qui découpe la région ciblée en brûlant le tissu périphérique. Elle est plus particulièrement adaptée à l'isolement d'une vaste région tissulaire, de tissus résistants ou de chromosomes.
Accessible apres formation
Réalisation d'un test permetant d'évaluer la faisabilité du projet
